光譜帶寬,是紫外分光光度計的一個重要技術指標,很多人都不太清楚該指標對于儀器來說有什么關系,今天小編簡單為大家做一個介紹。
光譜帶寬是紫外分光光度計分析誤差的主要來源,一般來說,吸光度測量的準確度,取決于儀器的光譜帶寬與樣的自然帶寬的比率,自然帶寬被定義為大吸收值的1/2處的吸譜帶寬度。實驗表明,光譜帶寬與自然帶寬的比例小于0.1時,吸光度準確度可高達99.5%;如果比例增大,則吸光度測量誤差會增加,當自然帶寬大于或等于20時,2nm的光譜帶寬對于吸光度的準確測定是足夠的,可滿足大約99%的日常分析,這也是我國藥典規定用于藥檢的紫外分光光度計的光譜帶寬一定要求≤2nm的原因。研究表明:光度準確度測量時,必須注意紫外可見分光光度計光譜帶寬的選擇。
1、光譜帶寬小,則對應的狹縫寬度小,此時的雜散光也小,可提高吸光度測量的準確度。
2、光譜帶寬小,則對應的狹縫窄,但單色光的單色性也好,更能接近單色光,可減少Beer定律的偏離,提高測量精度。
3、光譜帶寬小,對同一自然帶寬來講,波長準確度會高,因為不同的波長,有不同的摩爾吸光系數,所以,波長準確度高時,光度準確度測試誤差小。
但必須注意:光譜帶寬不能太小,否則信號弱,儀器的信噪比小,靈敏度差。
很多人會混淆紫外分光光度計狹縫寬度和光譜帶寬,其實這是不對的,原因如下:
1、狹縫寬度是指紫外可見分光光度計狹縫的機械寬度。一般來講,儀器的狹縫寬度是一個保密數據。因此,制造商不會或沒有必要在儀器說明書中、在有關的儀器樣本上給出儀器的狹縫寬度,所以講狹縫寬度為:多少是沒有根據的。
2、儀器制造商應該或必須告訴用戶儀器的光譜帶寬是多少。因為光譜帶寬是紫外可見分光光度計分析誤差的主要來源,往往不同的試樣要求用不同的光譜帶寬測試,對試樣來講,有理想的光譜帶寬的要求。